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非洲豬瘟檢測儀
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非洲豬瘟PCR試劑盒速測盒

非洲豬瘟PCR試劑盒速測盒

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產品簡介:使用試劑前實驗前請仔細閱讀本試劑盒說明書,嚴格按步驟執行,不使用本試劑盒提供的組份或不按照說明書進行實驗可能導致錯誤結果。...

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產品介紹

非洲豬瘟試劑盒速測盒

  通用名稱:非洲豬瘟病毒熒光PCR快速檢測試劑盒

  商品名稱:無

  漢語拼音:Feizhouzhuwenbingdu Yingguang PCR Kuaisu Jiance Shijihe

  英文名稱:Real-time PCR for Rapid Detection of African Swine Fever Virus

  【主要成分與含量】

  序號成分含量

  PCR反應液2Solution A管(5ml/管)

  3Solution B管(5ml/管)

  4 1管(0.5ml/管)

  5 說明書·組織樣品處理:分別從豬肉組織、淋巴結、脾臟不同位置取樣,用手術剪剪碎混勻后取0.1g于研磨器中研磨,加入1.5ml生理鹽水繼續研磨,待勻漿后轉至1.5ml無菌離心管,12000 r/min離心2分鐘,取上清200μl備用。

  ·根據不同的樣本類型,按照下表準備相應的樣本用量。

  ·樣本充分裂解后(95℃金屬浴振蕩孵育的樣本需恢復室溫),加入下表推薦體積的Solution B,并渦旋震蕩30 s,12000rpm離心2min,上清即為模板DNA。

  樣本用量處理溫度及時間全血100 μl100 μl

  唾液00ul100 μl

  1個95℃,3-5min10 μl室溫靜置3-5min備注:組織樣本加入10倍體積的生理鹽水制成組織勻漿液后,可按照血液樣本的處理方法進行處理。

  1.1.3可利用商品化試劑盒提取核酸進行反應,效果更佳

  1.2 熒光PCR擴增

  1.2.1 試劑準備

  按下表1體系,在配套PCR管中配制反應體系,蓋緊管蓋后瞬時離心10秒,轉移至擴增區。

  PCR反應液預準備的模板(樣本/對照)20μl

  1.2.3 PCR擴增

  表2 儀器PCR擴增參數

  溫度循環數

  95℃1

  95℃40

  20 s(采集熒光信號)

  ·陰性對照:無Ct值,線形為直線或微斜,無明顯指數增長。

  ·樣本檢測結果Ct值≤38,有明顯指數增長,判定為陽性,表明樣本中檢測出非洲豬瘟病毒。

  ·樣本檢測結果無Ct值,判定為陰性,表明樣本中未檢測出非洲豬瘟病毒。

  【注意事項】

  (1)實驗前請仔細閱讀本試劑盒說明書,嚴格按步驟執行,不使用本試劑盒提供的組份或不按照說明書進行實驗可能導致錯誤結果。

  (2)所有試劑應在規定溫度儲存。-20℃保存的試劑在使用前應充分混勻。試劑盒反復凍融次數不宜超過5次。

  (3)實驗操作應按照國家有關臨床基因擴增實驗室管理規范執行,實驗過程應分區(試劑準備區、樣本制備區、核酸擴增區),各區物品為專用,不得交叉使用,避免污染。

  (4)操作臺、移液器、離心機等儀器用品應經常用1%次氯酸鈉、75%乙醇或紫外燈進行消毒。耗材應進行無酶處理。

  (5)待檢樣本、試劑盒組份及實驗中的廢棄物需按照具有潛在傳染性物質處理方法進行處理。

  (6)為防止熒光干擾,應避免使用含熒光物質的手套,避免用手直接接觸,預防交叉污染。

  (7)檢測結果為陰性,并不完全代表為非感染狀態,具體診斷需結合獸醫臨床。

  (8)產生假陰性的可能原因為:待檢樣本在采集、運輸、保存及核酸提取過程中操作不當造成DNA降解;樣本中核酸濃度低于最低檢測限;病毒待測靶基因出現變異;未經驗證的其他干擾因素。

  (9)產生假陽性的可能原因為:待檢樣本采集、運輸及核酸提取過程中發生交叉污染。

  【規格】 50反應/盒

  【貯藏及有效期】 試劑盒-20℃以下冷凍避光保存,有效期為12個月。


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